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五分類血細胞分析儀檢測原理
發布時間:2022-10-18 08:57:47

正常情況下、外周血中,有形血細胞主要包括:

紅細胞、白細胞和血小板三大類。

白細胞正常情況下又份為:有粒白細胞(中性粒細胞、嗜酸性粒細胞和嗜堿性粒細胞)和無粒細胞(淋巴細胞和單核細胞)。這樣白細胞就一共分出了五個類型,所以檢測這白細胞的五個類型的相應血細胞分析儀就叫五份類血細胞分儀。

下面先看看各五種白細胞在正常情況下的細胞大小、細胞質的多少、細胞核的形狀等物理結構。

細胞直徑大小

細胞質

細胞核

淋巴細胞

6-12微米

少、嗜堿性

大、圓

單核細胞

14-20微米

多、弱嗜堿性

卵圓形、腎形、馬蹄形或不規則形

嗜中性粒細胞N

10-12微米

細小均勻的嗜中性顆粒

桿狀或分2-5葉、以3葉為主

嗜酸性粒細胞E

12-15微米

大小一致、分布均勻的嗜酸性顆粒

常分2葉

嗜堿性粒細胞B

10-12微米

大小不一、分布不均的嗜堿性顆粒

不規則、呈分葉狀或S形

那么這五個類型的白細胞是根據什么原理來分類的呢?

目前主要是根據細胞的如下幾個特性來分類:細胞的大小、核漿比例、細胞內細胞器的復雜程度、細胞核所含核酸的多少以及對某些化學試劑(或/和)熒光染液的敏感程度來區分之。

根據白細胞的以上特性,不同廠家、不同型號的五份類血細胞分析儀其檢測分析的原理是不同的。但其最基本的原理目前無非就以下幾種情況:

1、利用這五類細胞對不同化學試劑(溶血劑或叫溶血素)的溶解性質不同(如嗜酸細胞試劑和嗜堿細胞試劑)以及結合白細胞直方圖細胞三分群的庫爾特(電阻抗法)檢測原理將白細胞分為五類。

例如:

    早期的Abcus Junior5儀器,(行業內常稱為假五分類),當然比起三分群的儀器分類精準了不少,但還是存在很大偏差,因為有些細胞是采用大小分群(即脈沖的大小)和計算出來的。

2、四角度照射法:

 90°角區分分葉核細胞和單核細胞得到兩類:

中性粒細胞和嗜酸性粒細胞(分葉核細胞);

單核細胞和淋巴細胞及嗜堿性粒細胞(單核的嗜堿性粒細胞)。

    用90°偏振區分:

嗜酸性粒細胞和中性粒細胞。

    用0°和10°通過核質比及細胞大小,將嗜堿性粒細胞從淋巴和單核細胞中群中分開。

    用0°根據大小區分單核細胞和淋巴細胞。

   此類儀器以優利特生產的URIT5160五分類為代表。

3、細胞化學-體積法:化學性溶血劑一方面作用于紅細胞使紅細胞破壞釋放血紅蛋白,另一方面還作用于白細胞,使白細胞膜表面產生小孔,細胞內漿質外溢,細胞失水皺縮,細胞膜緊貼于核上。測定時細胞的體積大小是核、顆粒和膜成分的總和,白細胞種類不同、分化程度不同所含的胞漿顆粒、核結構以及大小也不同。運用V.C.S三種探針,在流式通道的某一位點,對通過的單列白細胞,進行逐個的、同時的、三重的檢測,以及三維分析,以確定其亞群性質。

V-低頻波(Volume):      采用低頻電流準確分析細胞體積;

C-高頻波(Conductivity):   采樣高頻電流分析細胞核型;

S-激    光(Scatter):   該激光束可穿透細胞,探測細胞內核分葉狀況和胞漿中顆粒情況,分析細胞的顆粒特性。

此類儀器以貝克曼庫爾特為代表的LH750

4、利用半導體激光散射和核酸熒光染色技術

    前向散射光:檢測細胞的大小;

    側向散射光:檢測細胞內細胞內容物的復雜程度;

    側向熒光:  檢測細胞核酸的多少。

    利用這三個參數將白細胞分為五類。

此設備原理是目前較為流行的測量方法,以SYSMEX的五份類為代表,代表機型有XN等系列。

  以上這些分類方法還都在圍繞細胞的物理結構和理化性質上分析,并未對細胞進行功能性質和生理機制的分類,筆者相信,在不遠的將來將有一次革命性的大突破。因為臨床上更喜歡細胞的功能性質及異常細胞的分析分類,這樣的檢測結果其臨床價值及臨床意義會更大,這是趨勢!

就目前現狀來看、目前最經典的方法當然還是手工制片染色利用顯微鏡人工觀察分類,這才是金標準,但這一方法要求檢驗人員的細胞形態學的基本功要過硬,這就無疑要求檢驗人員不斷學習,熟練掌握反復鍛煉對形態的觀察和辨別能力。對儀器檢測結果的異常報警提示要負責任的進行人工復檢,以防漏檢、耽誤臨床的確診及延誤患者的治療。

注意事項:

   1、由于在病理情況下(白血病、貧血等),有核紅細胞的存在,使得白細胞總數異常升高,在有些儀器中,根據測量的有核紅細胞百分比,從白細胞中已扣除;但有些儀器沒有扣除,所以用戶一定要清楚自己使用的儀器性能有無從白細胞總數中扣除有核紅細胞的功能,如果沒有此功能要手工推片染色人工顯微鏡下分類,按有核紅細胞的百分比例從白細胞總數中扣除之,這一點一定要明確的寫在實驗室的SOP文件中。

    2、高端精準的檢測設備當然對臨床診斷疾病大有幫助,但設備和耗材的價格也相當昂貴,一份價格一份貨啊!我國地域遼闊,各地區、各醫院的經濟狀況發展不均衡,所以我們一概的不能追求高大上,要根據當地經濟情況、政府財政資助和老百姓的經濟收入綜合考慮,選擇適合貴院的相應設備。

(文章來源于互聯網)


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